玫瑰(RosarugosaThunb)属蔷薇目

玫瑰(RosarugosaThunb)属蔷薇目，不同比较蔷薇科落叶灌木，产地成分主要包括重瓣玫瑰、大马大马士革玫瑰、士革百叶玫瑰、玫瑰香水月季等不同品种，精油主要分布于北半球，分析以保加利亚、不同比较摩洛哥、产地成分土耳其、大马法国、士革俄罗斯等国家，玫瑰其中保加利亚玫瑰最为著名。精油我国玫瑰资源也相当丰富，分析目前各地均有种植，不同比较其中以甘肃、北京、江苏、云南等地为主。玫瑰花精油含量一般在0.1％以下，精油包含醇类、烷烃类、酯类和萜烯类等多种特殊活性成分，已经被广泛应用于药品和化妆品等领域，具有护肤美容、舒缓情绪、抗氧化活性、抑菌杀菌、抗血栓及改善血液循环、抗肿瘤等不同功效。

保留时间指数法是目前使用广泛的分析定性方法，由于玫瑰精油中萜烯、醇类等类化合物存在同分异构体或同系物，仅用质谱库检索和匹配度定性会出现多种可能性，使化合物定性不准确，借助保留指数定性可提高其定性准确性。目前，国内外对玫瑰精油提取工艺及香气成分研究较多，但针对云南不同产地大马士革玫瑰精油成分差异的研究未见报道。本实验在前人研究的基础上，以云南玉溪峨山、曲靖沾益、昆明石林、大理云龙县种植的大马士革玫瑰花为研究对象，采用水蒸气蒸馏法提取精油结合GC/MS对其成分进行了对比分析，经质谱检索后，匹配度结合保留指数对其定性，较好地鉴别了同分异构体或同系物，避免了在定性过程中出现误判，提高定性的准确性。另外，通过对云南不同产地大马士革玫瑰精油成分系统研究，为其在药品和化妆品等领域应用提供了指导。

一、材料与方法

1、材料与设备

（1）材料与试剂

试验样品为2018年4月至6月采自云南玉溪峨山、曲靖沾益、昆明石林、大理云龙县种植的玫瑰花，品种为“大马士革玫瑰(Rosedamascene)”，从玫瑰植株中随机选取花蕊刚露的玫瑰花，带回实验室-20℃保鲜贮藏。

二氯甲烷、甲醇、乙醚、硫酸钠、正己烷，GR级，由百灵威科技有限公司提供；正构烷烃C₇～C₃₀，Sigma-Aidrich公司提供。

（2）仪器与设备

Agilent7890A/5975C气相色谱-质谱联用仪+自动进样器(美国安捷伦科技有限公司)；98-1-B调温电热套(天津泰斯特仪器有限公司)；磨口挥发油提取仪(北京市永光明医疗仪器厂)；万分之一电子天平(瑞士MettlerTloede公司)；5mL移液器(德国Eppendorf公司)。

2、方法

（1）玫瑰精油提取方法

参照文献方法，将云南不同产地大马士革玫瑰花，去除花托，将花瓣混合。称取约250g玫瑰花，置于圆底烧瓶中，加入1000mL蒸馏水浸泡12h，水蒸气蒸馏法提取4h，乙醚萃取流出液，低温除尽溶剂后无水硫酸钠干燥过滤，获得4种玫瑰精油备用，待进行GC/MS分析。

(2)玫瑰精油成分分析

准确称取玫瑰精油0.20g，用甲醇/二氯甲烷(体积比为1:4)混合溶液稀释到10mL，用0.45μm有机相滤膜过滤，直接进GC/MS分析。色谱条件：DB-5ms毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，载气为氦气(纯度为99.999％)，流速：1.0mL/min。升温程序：初始温度50℃，保持2min；以4℃/min的速率升温至230℃，保持20min。进样口温度：250℃，进样量：1.0μL，分流比：20:1，溶剂延迟6min。质谱条件：电轰击电离(EI)源；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；电离能量：70eV；传输线温度：280℃；扫描范围(m/z)：40～450，质谱检索图库：NIST谱库。

（3）定性方法

移取正构烷烃C₇～C₃₀标准品，用正己烷溶液将其稀释成质量分数为5％溶液，按照Agilent7890A/5975C气相色谱-质谱联用仪+自动进样器(美国安捷伦科技有限公司)；98-1-B调温电热套(天津泰斯特仪器有限公司)；磨口挥发油提取仪(北京市永光明医疗仪器厂)；万分之一电子天平(瑞士MettlerTloede公司)；5mL移液器(德国Eppendorf公司)这些仪器操作条件进样，求出正构烷烃C₇～C₃₀保留时间，为下一步计算玫瑰精油中各成分保留指数作准备。

根据VandenDool和Kratz的线性程序升温的保留指数原理，利用自编软件求得保留指数(KI)值：

式中：t_R为保留时间，下标x表示待分析化合物，下标n和n+1分别表示正构烷烃的碳原子数。

玫瑰精油经过GC/MS分析后，利用仪器自带NIST质谱库对精油中化学成分进行自动检索，然后通过自我开发的保留指数软件求出各成分保留指数，将软件计算的保留指数与ESO精油数据库中保留指数进行比对(可接受误差不超过3％)，对其进行定性。

二、结果与分析

1、玫瑰精油成分分析

云南不同产地大马士革玫瑰精油经GC/MS检测所得到总离子流色谱图见图1～4，其结果采用Nistll进行检索后结合ESO香精保留指数进行对比对其定性，利用面积归一化法计算得出玫瑰精油中各成分峰面积相对百分含量，结果见表1所示。

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