满山常用来治疗慢性气管炎

满山红来源于杜鹃花科杜鹃属植物兴安杜鹃(Rhododendron dauricum L.)的建立鹃素叶。满山红在治疗咳喘方面效果突出，满山常用来治疗慢性气管炎，红叶含量慢性支气管炎等[2]。指纹满山红以黄酮类、图谱香豆素类、并测有机酸类、定杜挥发油类等化学成分为主，建立鹃素其中药效作用突出的满山是黄酮类[3]，包括杜鹃素、红叶含量山奈酚、指纹金丝桃苷等。图谱中药材含有的并测化学成分复杂，影响其化学成分种类和含量的定杜因素也很多，因此需要规范中药材的建立鹃素质量标准。中药指纹图谱可以使得到的有用化学信息最大化，起到把控中药产品的质量的作用[4]。因此建立中药指纹图谱意义重大，也为后续中药材研究奠定基础。

1 仪器与材料

1.1 主要仪器
美国Agilent公司的1260型高效液相色谱仪；美国THERMO公司的G10S UV-Vis型紫外分光光度计；昆山市超声仪器有限公司的KQ-250DE型医用数控超声波清洗器；德国赛多利斯公司的BP211D型天平(d=0.01 mg)；天津市泰斯特仪器有限公司的98-1-B型电子控温电热套。

1.2 实验材料

1.2.1 试剂

实验中高效液相色谱仪使用的是美国Fishers公司生产的色谱级甲醇、乙腈和甲酸，水为超纯水；除此之外实验用到的试剂为分析纯。

1.2.2 试药

杜鹃素(批号：201605)为中国药品生物制品检定所生产。

1.2.3 饮片来源

满山红药材购于黑龙江五林、黑龙江林口、吉林通化，每个产地5批药材，分别是五林01～05、林口01～05、通化01～05，共15批，编号分别是S1～S15。由中国科学院长春应用化学研究所质谱中心皮子凤副研究员鉴定为兴安杜鹃Rhododendron dauricum L.叶。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

将杜鹃素对照品精密称量，取适量甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得。

2.2 供试品溶液的制备

选用满山红叶100 g，采用回流法提取2回，第1回加入12倍水，放置30 min，回流提取30 min，过200目滤布，滤液备用；药渣第2回加入10倍水，提取20 min，过200目滤布，合并2次滤液，减压浓缩至500 mL，冻干，取冻干粉0.1 g，加入20 mL水超声提取(功率100W，频率40 KHz)60 min，放至室温，摇匀，过0.45 μm的微孔滤膜，即得。

2.3 色谱条件的确定

2.3.1 色谱条件

采用Shim-Pack XR-ODS Ⅲ (2.0 mmi.d×150 mm)色谱柱，用甲醇-0.3%甲酸水溶液为流动相系统梯度洗脱，流速为0.2 mL·min-1，梯度洗脱，检测波长为297 nm，柱温为25 ℃，进样量为10 μL。梯度见表1。

2.3.2 空白溶剂干扰考察

将甲醇作为空白溶剂，按照“2.3.1”项色谱条件，开始检测。满山红叶的指纹图谱不受空白溶剂影响。见图1。

2.3.3 对照品和供试品峰比对

将“2.1”项的对照品溶液和“2.2”项的供试品溶液，按照“2.3.1”项的色谱条件，用高效液相色谱仪检测。结果显示所选药材中含有杜鹃素。对照品色谱图见图2，供试品色谱图见图3。

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